威尼德紫外交聯(lián)儀：在Northern blotting、Southern blotting、EMSA等尼龍膜、硝酸纖維素膜的交聯(lián)、Sterilization(滅菌)、DNA Nicking(DNA缺失)的應(yīng)用。
紫外交聯(lián)技術(shù)是一種常用于材料科學(xué)和化學(xué)領(lǐng)域的重要技術(shù)手段。隨著材料研究的不斷深入，紫外交聯(lián)儀逐漸成為了廣泛應(yīng)用的分析設(shè)備。
紫外交聯(lián)儀利用紫外光對(duì)材料進(jìn)行照射，通過(guò)能量的輸入和材料分子之間的相互作用，實(shí)現(xiàn)材料的共價(jià)鍵形成或斷裂。當(dāng)紫外光照射在材料上時(shí)，光能激發(fā)材料內(nèi)部的電子，使其躍遷到較高的能級(jí)。這些激發(fā)態(tài)的電子會(huì)與周圍的分子發(fā)生相互作用，進(jìn)而導(dǎo)致化學(xué)鍵的形成或斷裂，從而實(shí)現(xiàn)材料的交聯(lián)或解交聯(lián)。
紫外交聯(lián)儀在材料科學(xué)中有廣泛的應(yīng)用。首先，在涂料和粘合劑領(lǐng)域，可用于評(píng)估和控制材料的交聯(lián)程度，從而影響材料的硬度、耐久性和附著力。其次，在聚合物材料領(lǐng)域，可用于研究聚合反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，確定較佳交聯(lián)條件和優(yōu)化聚合物的性能。此外，還可應(yīng)用于紡織品、電子器件、醫(yī)療器械和涂層等領(lǐng)域。
紫外交聯(lián)儀作為一種分析設(shè)備，在材料科學(xué)中具有多個(gè)優(yōu)勢(shì)。首先，操作簡(jiǎn)單、速度快，可實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)交聯(lián)反應(yīng)的進(jìn)行，提高研究效率。其次，具有較高的靈敏性和準(zhǔn)確性，可以對(duì)微小的交聯(lián)變化進(jìn)行檢測(cè)和測(cè)量。另外，不需要添加化學(xué)試劑，對(duì)樣品無(wú)損傷，適用于各種材料的表面和體積分析。
紫外交聯(lián)儀作為一種重要的分析設(shè)備，在材料科學(xué)中發(fā)揮了重要作用。它通過(guò)紫外光的照射實(shí)現(xiàn)材料的交聯(lián)或解交聯(lián)，應(yīng)用廣泛。它具有操作簡(jiǎn)單、速度快、靈敏性高等優(yōu)勢(shì)，能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)交聯(lián)過(guò)程，并對(duì)材料的性能進(jìn)行評(píng)估和控制。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，它在材料科學(xué)中的應(yīng)用前景將更加廣闊。
1.Membrane Blotting(膜印跡)
威尼德生物科技(北京)有限公司VL系列紫外交聯(lián)儀可用于Northern、Southern blotting、EMSA等膜交聯(lián)，當(dāng)使用254 nm波長(zhǎng)、能量為120.0mJ/cm2交聯(lián)時(shí)，尼龍模的氨基和DNA的胸腺嘧啶(或RNA的尿嘧啶)之間形成共價(jià)鍵穩(wěn)定。
(1)將一張或兩張用轉(zhuǎn)移緩沖液(如10×SSC)輕輕潤(rùn)濕的吸水紙放在VL系列紫外交聯(lián)儀的樣品腔。將尼龍膜放在吸水紙上，使附著核酸的一面朝上，使紫外線燈管能夠直接照射核酸。
(2)關(guān)閉VL系列紫外交聯(lián)儀的門。
(3)按下Run/Pause(運(yùn)行/暫停)按鍵啟動(dòng)，當(dāng)紫外線燈管亮?xí)r，顯示屏將立即開始從輸入值開始累計(jì)。如果在曝光期間的任何點(diǎn)打開門，照射將停止，并顯示已曝光值。(關(guān)上門按Run/Pause按鍵繼續(xù)照射。)
(4)輻照完成后，蜂鳴器將鳴響約3–4秒。自動(dòng)交聯(lián)大約需要25–50秒。
(5)取下尼龍膜并關(guān)上門，交聯(lián)完成。每次使用后，清潔紫外線交儀樣品腔，以清除殘留的鹽。
2.DNA Nicking(DNA缺失)
威尼德生物科技(北京)有限公司紫外線交聯(lián)劑也可用于切割溴化乙錠染色的瓊脂糖凝膠中的DNA，代替HCl洗滌液，瓊脂糖凝膠中比較大的DNA(>20kb)的轉(zhuǎn)模效率很低，因此DNA在轉(zhuǎn)移到尼龍膜之前需要進(jìn)行前處理。DNA可通過(guò)HCl或紫外線照射進(jìn)行切割。HCl脫嘌呤反應(yīng)較難控制，且對(duì)溫度極為敏感。所以在轉(zhuǎn)移前，在短波長(zhǎng)紫外光(254 nm)中80.0mJ/cm2切割DNA的方法更可靠。
3.Sterilization(滅菌)
紫外線殺菌就是通過(guò)紫外線照射，破壞及改變微生物的DNA(脫氧核糖核酸)結(jié)構(gòu)，使細(xì)菌當(dāng)即死亡或不能繁殖，達(dá)到殺菌的目的。真正具有殺菌作用的是UVC紫外線，因?yàn)镃波段紫外線很容易被生物體的DNA吸收，尤其是254nm波長(zhǎng)左右紫外線最佳。紫外線殺菌屬于純物理消毒方法，具有簡(jiǎn)單便捷、光譜高效、無(wú)二次污染。因此在短波長(zhǎng)紫外光(254 nm)中滅菌95sec。
4.RecA Screening(RecA篩選)
紫外線交聯(lián)劑也可用于篩選RecA突變體，在短波長(zhǎng)紫外光(254 nm)中40.0mJ/cm2照射下，recA突變體阻止了紫外線誘導(dǎo)損傷的修復(fù)，阻止了紫外照射過(guò)的過(guò)的recA細(xì)胞的生長(zhǎng)。
